- 微生物的分离和培养
- 共178题
海洋上的石油泄漏会对海洋造成污染。自然环境中假单孢杆菌能够分解石油，请回答下列问题：
（1）假单孢杆菌同化作用类型是 ，属于生态系统成分的 。欲从自然环境中分离提纯假单孢杆菌，除了基础营养外，可在培养基中必须加入石油，制成 培养基。
（2）下面是某实验小组做的假单孢杆菌分离和计数的实验方案及结果，其中有4处明显错误,请指出并改正。
a.将溶化后的培养基倒平板备用。
b.将接种环放在酒精灯的火焰上灼烧后立即沾取一环菌液，然后，将培养皿皿盖轻轻放在桌面上，手拿培养皿，在火焰旁划平行线，盖上皿盖。
c.将接种过的培养皿倒置放入恒温箱内，在适应条件下培养一段时间并观察结果。
d.统计出三个培养皿中菌落的数目分别为21、212和256，以这三个平板上菌落的平均值163作为统计结果。
① ；
② ；
③ ；
④ ；
（3）用假单孢杆菌进行实验后，所有用过的培养液、培养基等必须经过 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散，污染环境。
正确答案
见解析。
解析
（1）异养型 分解者 选择培养基
（2）① 培养基没有灭菌；应灭菌。
② 接种环温度太高将菌种烫死；接种环灼烧后应冷却，再沾取菌液。
③ 不要将培养皿皿盖放在桌子上；应将培养皿皿盖打开一条缝。
④ 三个统计结果，其中一个结果与另两个结果数据相差太多；需要重新做。
（3）灭菌
知识点
酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：
（1）从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，该培养基属于_________培养基。该培养基的氮源来自_________。
（2）筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是_________和_________。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时，需用移液管将１mL菌液移入盛有_________mL蒸馏水的试管中。
（3）对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量_________（多于／等于／小于）后者，其原因是_________。
（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入_________溶液中。右表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用_________g/dL。若利用固定化酶技术，它的优点是_________。
正确答案
（1）选择；尿素；葡萄糖
（2）平板划线法；稀释涂布平板法； 9
（3）多于；有些菌落连接在一起，计数偏小
（4）CaCl2；2.0；可重复利用，且利于产物的纯化
解析
（1）培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，尿素是唯一的氮源，所以该培养基属于选择培养基，葡萄糖主要作为碳源和能源。
（2）在固体培养基上接种常用的方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时，溶液总量为10mL，需用移液管将1mL菌液移入盛9mL蒸馏水的试管中。
（3）使用稀释涂布平板法进行微生物计数时，有些菌落连接在一起，结果可能会偏小。
（4）用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入CaCl2溶液中，利用固定化酶技术的优点是可重复利用，且利于产物的纯化。
知识点
回答下列有关微生物的问题：
（1）19世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。在生产过程中，发现葡萄酒变酸，表面观察到菌膜，造成该现象的生物是 。腐乳外部有一层致密的皮，这是 的匍匐菌丝形成的。制作泡菜时，有时坛内会长一层白膜，这是 繁殖形成的。
（2）培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，除此之外，还需要满足微生物生长对pH、
及氧气的需求，例如培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素。
（3）微生物的接种方法很多，如平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种和穿刺接种等方法，虽然这些技术的操作方法各不相同，但是其核心都是要 ，保证培养物的纯度。由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的 ，就是菌落。
（4）从土壤中分离出分解尿素的细菌之后，要对其进行进一步的鉴定，要在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 ，如果指示剂变 ，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
（5）灭菌是用 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。对培养皿灭菌常用的方法是 。在进行平板划线时，划线操作结束后， （需要或不需要）灼烧接种环。
正确答案
（1）醋酸菌；毛霉；酵母菌
（2）特殊营养物质
（3）防止杂菌的污染；子细胞群体
（4）酚红指示剂；红
（5）强烈的理化因素；干热灭菌；需要
解析
略
知识点
下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。
（1）大肠杆菌的同化类型为____，从生态系统的成分上看，大肠杆菌屑于 。
（2）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是____，因此需对培养基和培养皿进行____（填“消毒”或“灭菌”），操作者的双手需要进行清洗和____。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使 ，还能破坏DNA的结构。
（3）根据用途划分，该培养基属于____（填“选择”或“鉴别”）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中____换成____，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红·美蓝换成____。
（4）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是——和—__。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为____。
（5）使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是 （多选）。
A，制作果酒 B，由果酒制作果醋 C，制作泡菜 D，制作腐乳
正确答案
答案：
（1）异养型 分解者
（2）防止外来杂菌的入侵 灭菌 消毒 蛋白质变性
（3）鉴别 蛋白胨 尿素 酚红指示剂
（4）平板划线法 稀释涂布平板法 菌落
（5）BC（2分）
解析
略
知识点
据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众普遍关注。葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题。
（1）某兴趣小组欲检测某果汁类食品中含有葡萄球菌，请帮他们完善下列步骤。
①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节pH，分装到锥形瓶后进行_______________，在无菌状态下加入卵黄液
（100ml 10％灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀后立即倒平板。
②接种：取待检测果汁2。5ml加入22。5ml灭菌生理盐水中，制成接种样液。
实验组：将接种样液用___________法接种在含卵黄的固体培养基上。
对照组：将__________用平板划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为__________对照。
将上述接种后的培养皿同时放在36℃的恒温箱中培养48h。
③观察：观察培养基表面_______________。
（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供__________________。
葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液 可以将它分离出来，此培养基属于________________培养基。
（3）若要统计某土壤样品中该活茵数目，宜采用____________法。
正确答案
答案：
（1）① 灭菌(高压蒸汽灭菌)（1分）
② 平板划线(其它方法不得分) 无菌生理水 空白
③ 是否出现周围有乳浊环的菌落
（2）碳源和氮源 选择 （3）稀释涂布平板
解析
略
知识点
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